Prévention de la mammite infectieuse par administration orale de Lactobacillus salivarius PS pendant la grossesse tardive

Contexte Des études antérieures ont montré que l’administration orale de lactobacilles peut être une approche efficace pour traiter la mammite infectieuse lactationnelle. Dans cette étude, nous avons évalué le potentiel de Lactobacillus salivarius PS pour prévenir cette maladie lorsqu’il est administré par voie orale à des femmes ayant contracté une mammite infectieuse. Après les grossesses précédentes Méthodes Dans cette étude, les femmes enceintes ont été assignées aléatoirement à l’un des groupes. Les membres du groupe probiotique n = ont ingéré quotidiennement des unités formant des colonies de L salivarius PS d’environ une semaine de grossesse jusqu’à l’accouchement, alors que celles du groupe placebo a reçu un placebo L’apparition de la mammite a été évaluée au cours des premiers mois après l’accouchement. Résultats Globalement, des femmes ont développé une mastite; cependant, le pourcentage de femmes atteintes de mammite dans le groupe probiotique% [n =] était significativement plus faible que dans le groupe témoin% [n =] Lorsque la mammite se produisait, les numérations bactériennes du lait dans le groupe probiotique étaient significativement inférieures à celles obtenues dans le groupe témoin. groupe placeboConclusions L’administration orale de L salivarius PS à la fin de la grossesse semble être une méthode efficace pour prévenir la mammite infectieuse dans une population sensible. Enregistrement des essais cliniques NCT

mammite, prévention, probiotiques, Lactobacillus salivarius, grossesseLes effets de l’allaitement sur la santé sont bien reconnus et s’appliquent aux mères et aux nourrissons dans les pays développés et en développement ; par conséquent, cette option d’alimentation infantile a été recommandée par plusieurs organisations de santé importantes, y compris l’Organisation mondiale de la santé, l’American Academy of Pediatrics, l’American College of Obstetricians and Gynecologists et l’American Public Health Association. parmi eux, la mastite représente la première cause médicale de sevrage indésirable La mammite est généralement utilisée pour définir un processus infectieux de la glande mammaire caractérisé par une variété de symptômes locaux et, dans les cas aigus, systémiques La glande mammaire nourricière abrite de nombreux microorganismes En cas de perturbation de cet état équilibré, une infection peut survenir et des études récentes suggèrent que la mammite est liée à une dysbiose bactérienne mammaire Parce que la résistance aux antibiotiques et la formation de biofilms sont des propriétés communes chez les mammifères. Dans des études antérieures, nous avons rapporté que l’administration orale de certaines souches de lactobacilles aux femmes allaitantes constituait une alternative efficace aux antibiotiques pour le traitement de la mammite infectieuse [- ] Dans ce contexte, l’objectif de ce travail était s d’évaluer l’efficacité de l’administration orale de l’une de ces souches, Lactobacillus salivarius PS, pour prévenir le développement de la mammite lactationnelle dans une population de femmes enceintes ayant des antécédents de mammite après une grossesse précédente

MATÉRIAUX ET MÉTHODES

Conception de l’étude et définition de la mammite

Un total de femmes enceintes, âgées et en semaines de gestation, a participé à cette étude Tous répondaient aux critères suivants: grossesse normale, état de santé et antécédents de mammite après au moins une grossesse précédente. Femmes ingérant des suppléments probiotiques ou recevant des antibiotiques les traitements des jours précédents ont été exclus Tous les volontaires ont donné leur consentement éclairé au protocole, qui a été approuvé par le Comité d’Ethique de Recherche Clinique de l’Hôpital Clínico San Carlos Madrid Espagne L’étude a été enregistrée dans la base de données ClinicalTrialsgov NCT. Essai randomisé en double aveugle contre placebo Les volontaires ont été assignés au hasard, dans un rapport, en groupes «probiotiques» et «placebo» de taille égale, en utilisant une séquence d’attribution générée par ordinateur. Volontaires dans le groupe probiotique n = consommé une capsule quotidienne avec environ mg de probiotique lyophilisé approximativement log des unités formant des colonies [CFU] de L salivarius PS fr La probiotique a été fabriquée par Biopolis Valencia, Espagne, et maintenue à ° C tout au long de l’étude. Les femmes du groupe placebo n = ont reçu que l’excipient probiotique en poudre en poudre. Deux abandons ont été enregistrés dans ce groupe pour des raisons n’étaient pas liés à l’étude Tous les volontaires ont reçu un journal pour enregistrer la conformité à l’étude sur l’absorption du produit. Le pourcentage minimum de conformité du traitement total a été fixé à%

Diagnostic de la mammite et score de la douleur mammaire

Les symptômes de mammite ont été évalués par les sages-femmes pendant les premiers mois après la naissance. La mastite aiguë était définie comme une inflammation aiguë du sein avec ingurgitation locale, douleur, rougeur, diminution de la sécrétion lactée et symptômes pseudo-grippaux systémiques, alors que la mastite subaiguë était définie. comme une inflammation du sein accompagnée d’autres symptômes locaux ingurgitation, la douleur needlelike et / ou brûlant, la sécrétion réduite du lait sans symptômes systémiques Les deux définitions comprennent les cas associés à des comptes de bactéries et de leucocytes laitiers élevés & gt; log CFU / mL et & gt; Les cellules leucocytaires ont été quantifiées par microscopie optique après coloration différentielle de May-Grünwald-Giemsa. En cas de mammite, les volontaires ont été invités à noter les douleurs mammaires extrêmement douloureuses à nulles, suivant une procédure standard

Collecte et analyse microbiologique des échantillons de lait

Des échantillons de lait ml ont été prélevés et conservés comme décrit précédemment. Des échantillons ont été prélevés chez des femmes n’ayant pas présenté de mammite au cours de la période de suivi. Des échantillons ont été prélevés chez des femmes développant une mastite dès que possible. Des échantillons ont été étalés sur Baird Parker, Acide nalidixique Columbia, MacConkey, et Sabouraud dextrose chloramphénicol agar plaques bioMérieux, Marcy l’Etoile, France et incubés pendant des heures à ° C dans des conditions aérobies pour l’isolement sélectif et la quantification de la principale. agents impliqués dans la mastite infectieuse Après le comptage bactérien, les représentants de chaque type de morphologie de la colonie ont été identifiés par désorption laser assistée par matrice / ionisation-temps de vol MALDI-TOF; VITEK MS, bioMérieux dans Probisearch Tres Cantos, Espagne

Isolement et identification de L salivarius PS dans des échantillons de lait

On a demandé aux femmes de fournir un échantillon de lait au jour ± jours après la naissance. Ces échantillons ont été inoculés sur des plaques MRS Oxoid, Basingstoke, Royaume-Uni additionnées de l-cystéine g / L MRS-Cys Plaques ont été incubées comme décrit précédemment. comme L salivarius par MALDI-TOF ont été soumis à électrophorèse en gel de champ pulsé génotypage PFGE , et leurs profils ont été comparés à celui de L salivarius PS

Analyses statistiques

Les analyses par protocole ont été réalisées dans l’évaluation de l’efficacité du traitement probiotique. Les données microbiologiques ont été enregistrées en UFC / mL et transformées en valeurs logarithmiques avant l’analyse statistique. Les variables continues ont été exprimées en moyenne et en% intervalle de confiance après vérification de la normalité. analyse de variance ANOVA suivie de Bonferroni post test a été utilisée pour comparer l’âge et l’heure de début de la grossesse de l’étude entre les groupes probiotiques et placebo, et pour vérifier l’effet de l’intervention probiotique et le type de mastite subaiguë et aiguë sur le sein score de douleur BPS L’ANOVA bidirectionnelle a été utilisée pour étudier l’effet du traitement et l’état de santé des glandes mammaires sur les numérations staphylococciques / streptococciques ainsi que l’effet du traitement et du type de mastite sur BPS et pour étudier l’interaction possible des variables étudiées. en utilisant χ ou des tests de probabilité exacts de Fisher Une analyse de corrélation a été effectuée pour tester la relation entre les numérations staphylococciques / streptococciques dans le lait et le BPS La signification statistique a été fixée à P & lt; Statgraphics Centurion XVI version Statpoint Technologies Inc, Warrenton, Virginie a été utilisé pour effectuer des analyses statistiques

RÉSULTATS

Homogénéité des groupes

Dans cette étude, il n’y avait pas de différences significatives entre le groupe probiotique et le groupe placebo en ce qui concerne l’âge, le nombre de grossesses antérieures ou la semaine de grossesse au jour. Tableau La conformité au probiotique ou au placebo était>% Tableau Aucun effet secondaire ou indésirable liés à l’ingestion du probiotique ont été signalés tout au long de l’étude

Tableau Description générale des femmes incluses dans l’étude N = Caractéristique Probiotique Placebo P Valuea Nombre de sujets Âge, y Moyenne% IC – – Minimum / maximum / / Grossesses antérieures, Non CI moyen – – Minimum / maximum / / Temps de grossesse, wk% IC moyen – – Minimum / maximum / / Conformité,% CI moyen – – Minimum / maximum / / Caractéristique Probiotique Placebo P Valuea Nombre de sujets Âge, y Moyenne% CI – – Minimum / maximum / / Grossesses précédentes, Aucune moyenne % CI – – Minimum / maximum / / Durée de la grossesse, wk% IC moyen – – Minimum / maximum / / Conformité,% CI moyen – – Minimum / maximum / / Abréviation: IC, intervalle de confiancea Analyse de variance à sens uniqueView Large

Présence de mammite chez les participants à l’étude

La survenue de la mammite a été évaluée au cours des premiers mois après l’accouchement. La moyenne pour le jour de la lactation où les premiers signes de mammite sont apparus était de: – Globalement, les femmes de% ont eu une mastite; % des cas de mammite ont été classés comme subaigus, tandis que les cas aigus représentaient les% restants Tableau Des différences statistiquement significatives ont été trouvées entre les groupes probiotiques et placebo par rapport à la fréquence des mammites Le pourcentage de femmes atteintes de mammite dans le groupe probiotique% [n =] était significativement plus faible que dans le groupe témoin% [n =] P =, χ test; Table

Tableau de la présence de mastite au cours des premiers mois suivant l’accouchement chez les femmes incluses dans l’étude N = Condition Non Probiotique n = Non Placebo n = P Valeur Fréquence% Fréquence% Saine a Mastite Subaiguë b Aiguë Condition Non Probiotique n = Non Placebo n = P Valeur Fréquence% Fréquence% Saine a Mastite Subaiguë b Test a Ac aigu pour comparer la proportion de cas de mammite entre les groupes probiotiques et placebo b Test exact de Fisher pour comparer la proportion de cas de mammite subaiguë et aiguë entre le groupe probiotique et le groupe placebo

Les comptages bactériens dans les échantillons de lait

Globalement, le traitement probiotique ou placebo et l’état de santé du sein en bonne santé, la mammite a une influence significative P = pour les deux facteurs principaux, -Away ANOVA sur les comptes bactériens détectés dans le lait Lorsque les comptes bactériens moyens enregistrés dans des échantillons de lait de femmes en bonne santé qui avait reçu le probiotique n =; [% IC, -] log UFC / mL ont été comparés à ceux des femmes en bonne santé incluses dans le groupe placebo n =; [% IC, -] log UFC / mL, un petit [% IC, -] log UFC / mL mais une différence significative a été observée P & lt; , test t; Figure Les différences observées entre les deux groupes dans les comptes de lait bactérien obtenus chez les femmes atteintes de mammite subaiguë étaient plus élevées: Le nombre moyen de bactéries dans le groupe probiotique n = était% IC, – log UFC / mL, alors que dans le groupe placebo n = % IC, – log UFC / mL P & lt; , test t; Figure De même, des dénombrements bactériens moyens plus élevés ont été observés dans le lait provenant de femmes atteintes de mammite aiguë dans le groupe placebo n =; [% IC, -] log UFC / mL que dans le probiotique n =; [% CI, -] log UFC / mL groupe P =, test t; Figure

Figure View largeTaille de lectureCompensés staphylococciques / streptococciques dans les échantillons de lait fournis par les femmes recrutées N = Différences de numération staphylococcique / streptococcique moyenne entre les groupes pro probiotiques Pro et placebo Pla pour chaque statut sain, mammite subaiguë et mastite aiguë ont été évaluées avec t tests et sont affichés avec des lignes horizontales à l’intérieur du graphique * P & lt; ; ** P & lt; Abréviation: CFU, unités formant des coloniesFigure View largeTélécharger slideNombre streptococcique / streptococcique dans des échantillons de lait fournis par les femmes recrutées N = Différences de numérations staphylococciques / streptococciques moyennes entre les groupes pro probiotiques Pro et placebo Pla pour chaque statut sain, mammite subaiguë et mastite aiguë évalué avec t tests et sont affichés avec des lignes horizontales à l’intérieur du graphique * P & lt; ; ** P & lt; Abréviation: UFC, unités formant des colonies

Score de la douleur mammaire

La plupart des participants qui ont présenté une mammite / ont noté leur douleur mammaire entre et dans une échelle allant de extrêmement douloureuse à aucune douleur Il y avait une forte corrélation entre les valeurs BPS rapportées et les comptes bactériens laitiers r = -, P =, produit-moment de Pearson corrélation; Figure La consommation de L salivarius PS a eu un effet significatif sur les valeurs BPS P =, -way ANOVA; Tableau supplémentaire Des valeurs plus élevées de BPS, qui indiquent une douleur moins intense, ont été rapportées par les femmes dans le groupe probiotique BPS = [% IC, -]; n = comparé à ceux du groupe placebo BPS = [% CI, -]; n = P =, -Away ANOVA; Figure A En revanche, le type de mammite n’a pas déterminé de différences significatives dans les valeurs BPS P =, -way ANOVA; Tableau supplémentaire

Figure Vue largeDownload slideCorrélation entre les numérations laitières staphylococciques / streptococciques et le score de douleur mammaire BPS rapporté par les femmes ayant développé une mastite au cours de l’étude n = La corrélation entre les deux paramètres ligne noire continue suit le modèle: staphylocoques / streptocoques / ml = – × BPS; r = -, P = L’intervalle de confiance en% pour les numérations staphylococciques / streptococciques moyennes en fonction du BPS est représenté par une ligne grise solide, et les% d’intervalles de prédiction pour les nouvelles observations sont indiqués en pointillés externes. View largeTélécharger la diapositiveCorrélation entre les numérations laitières staphylococciques / streptococciques et le score de douleur mammaire BPS rapporté par les femmes ayant développé une mammite au cours de l’étude n = La corrélation entre les deux paramètres ligne noire continue suit le modèle: staphylocoques / streptocoques mL = – × BPS; r = -, P = L’intervalle de confiance en% pour les numérations staphylococciques / streptococciques moyennes en fonction du BPS est représenté par une ligne grise solide et les% d’intervalles de prédiction pour les nouvelles observations sont représentés par les pointillés externes.

Figure Vue largeDownload slideDistribution du score de douleur mammaire Valeurs BPS rapportées par les femmes ayant développé une mastite au cours de l’étude Les catégories de douleur mammaire étaient extrêmement douloureuses à nulles A, Différences entre les participants des groupes probiotiques et placebo P =; -analyse de la variance B, distribution de BPS dans le probiotique n =; barres blanches et le placebo n =; Groupes de barres grisesFigure Vue largeDownload de la douleur au sein score BPS rapportés par les femmes ayant développé une mammite au cours de l’étude Les catégories de douleur mammaire étaient extrêmement douloureuses à nulles A, Différences entre les participants des groupes probiotiques et placebo P =; -analyse de la variance B, distribution de BPS dans le probiotique n =; barres blanches et le placebo n =; Groupes de barres grises Parmi toutes les femmes atteintes de mammite, celles qui ont signalé des douleurs mammaires plus intenses au BPS étaient plus fréquemment observées dans le groupe placebo que dans le groupe P probiotique; Figure B En fait, toutes les femmes n = rapportant des seins extrêmement douloureux BPS = appartenait au groupe placebo Figure B

Isolement et identification de L salivarius PS dans des échantillons de lait

Un sous-ensemble de femmes du groupe probiotique et du groupe placebo ont respectivement fourni un échantillon de lait au jour après la naissance. Lactobacillus salivarius a été isolé à partir d’échantillons de lait du groupe probiotique% et d’échantillons de lait du groupe placebo% In des échantillons du groupe de probiotiques, les isolats de L salivarius présentaient un profil PFGE identique à celui de L salivarius PS En revanche, aucun des L salivarius détectés dans les échantillons de lait du groupe placebo ne présentait de profil PFGE compatible avec celui de la souche testée. L salivarius PS a connu une mammite

DISCUSSION

L’origine génétique de l’hôte peut également jouer un rôle clé dans l’issue de la lactation, car les différences de sélectine, antigènes de Lewis et déterminants génétiques des oligosaccharides du lait humain peuvent également prédisposer ou protéger contre la mammite en modifiant l’activation des neutrophiles et la production de neutrophiles. espèces réactives de l’oxygène On sait que le lait humain contient un large spectre d’autres substances biologiquement actives, y compris des peptides antimicrobiens eucaryotes, tels que la cathélicidine LL- Ce peptide est exprimé dans la glande mammaire et sécrété dans le lait, et présente une activité antimicrobienne pertinente Les polymorphismes ou variations du nombre de copies ou de l’expression des gènes codant pour la biosynthèse de tels peptides antimicrobiens peuvent être liés à la susceptibilité à la mammite Enfin, l’existence d’une base génétique pour les réponses de l’hôte à l’intramammaire bactérienne les infections ont été largement documentées chez les ruminants , alors que la mastite granulomateuse humaine due à une infection corynébactérienne a été associée à un polymorphisme mononucléotidique dans le gène NOD, altérant les réponses neutrophiles aux agonistes Nod Les mécanismes potentiels par lesquels certaines souches de Lactobacillus sont capables de contrôler les agents causant la mammite dans le sein L’ingestion de souches probiotiques en fin de grossesse et / ou allaitement augmente l’immunoglobuline A et transforme les taux de facteur de croissance β dans le lait, ce qui peut contrôler la croissance locale des bactéries responsables de la mammite tout en limitant leur capacité à accéder ou à endommager l’épithélium mammaire La caractérisation du profil métabolique urinaire des femmes allaitantes présentant une mastite a montré un métabolisme énergétique accru lactate, citrate, formiate, acétate, malonate et diminution du catabolisme des acides aminés à chaîne ramifiée isocaproate et isovalérate Cependant, traitement des mêmes femmes avec L salivarius PS a conduit à une forte baisse La modification des teneurs en acétate et en phénylpropionate après un apport probiotique suggère un effet immunomodulateur, tandis que l’augmentation des taux de malonate indique une stratégie antagoniste importante de L salivarius PS comme ce catabolisme. est un répresseur bien connu du cycle de l’acide tricarboxylique, qui altère le métabolisme staphylococcique et streptococcique et affecte négativement leur survie, leur virulence et leur capacité de formation de biofilm L’exclusion compétitive locale et la production d’antimicrobiens peuvent également expliquer le contrôle de la mammite. bactéries par certains lactobacilles Ceci impliquerait qu’une souche de Lactobacillus doit pouvoir atteindre la glande mammaire lors de l’ingestion. En fait, il a été suggéré que la présence de bactéries vivantes dans le lait humain est partiellement expliquée par le transfert bactérien de l’intestin maternel. à la glande mammaire à travers une voie entéromammaire, impliquant complexe dans Une translocation bactérienne accrue de l’intestin vers les ganglions lymphatiques mésentériques et les glandes mammaires chez les souris gravides et allaitantes a déjà été décrite Dans la même étude, la coloration à l’acridine orange du lait humain et les cytopréparations sanguines ont permis la détection de bactéries. cellules en association avec des cellules mononucléées maternelles D’autres études ont rapporté que l’administration orale de Lactobacillus reuteri, de Lactobacillus gasseri, de Lactobacillus fermentum et de L salivarius isolées du lait maternel aux femmes allaitantes a conduit à leur présence dans le lait maternel [,,]. Lactobacillus souche pour les femmes pendant la grossesse a entraîné la colonisation de leur intestin et, par la suite, de l’intestin de leur nourrisson allaité Malheureusement, le rôle des bactéries laitières comme source potentielle de la souche n’a pas été étudiée Évidemment, ce test clinique a ses forces et faiblesses. était composé de femmes qui ont développé une mastite après une Comme la mammite est une expérience particulièrement douloureuse et stressante pour les femmes qui allaitent, l’engagement des volontaires dans l’essai était très élevé et se traduisait par un très haut respect de l’ingestion du produit à l’étude. le fait que ces femmes ne représentent pas l’ensemble de la population enceinte limite l’applicabilité des résultats à d’autres cohortes. Cependant, étant donné la nature souvent récurrente de la mammite lactationnelle et les différences significatives d’incidence de la mammite observées entre les groupes probiotiques et placebo Dans cette cohorte, l’administration de L salivarius PS aux femmes enceintes a le potentiel d’améliorer la qualité de vie globale, de diminuer les antibiotiques et de diminuer les coûts de santé. Stratégies préventives visant à réduire la survenue de mammites, comme l’utilisation d’une souche probiotique spécifique , peuvent contribuer à étendre les avantages de l’allaitement maternel et sont, par conséquent, santé ic

Remarques

Remerciements Nous remercions R Martin et HGHJ Heilig pour leur critique du manuscrit. Soutien financier Ce travail a été soutenu par le projet AGL – P du Ministère de l ‘Economie et de la Compétitivité Espagne Conflits d’ intérêts potentiels Tous les auteurs: Aucun conflit signalé Tous les auteurs ont soumis Formulaire ICMJE pour la divulgation des conflits d’intérêts potentiels Les conflits que les éditeurs jugent pertinents pour le contenu du manuscrit ont été divulgués